Os presentamos 6 preguntas y respuestas sobre las células HUVEC.
Dudas comunes a tener en cuenta sobre este tipo celular antes, durante y después de trabajar con ellas.
Las células HUVEC (Human Umbilical Vein Endothelial Cells),se aíslan a partir del cordón umbilical.
En investigación se utilizan normalmente en fisiología y farmacología.
Algunos ejemplos son el estudio de transporte de macromoléculas, coagulación sanguínea y angiogénesis.
- 1. ¿Cómo se pueden aislar HUVEC a partir de cordón umbilical sin utilizar antibiótico?
- 2. ¿En qué se diferencian las HUVEC de Promocell de las ATCC?
- 3. ¿Qué tipo de células endotelial es más recomendable para estudiar angiogénesis?
- 4. ¿Cuántos pases aguantan las células HUVEC de Promocell?
- 5. ¿Las células de Promocell provienen de un único donante o de varios? ¿Qué diferencia hay?
- 6. ¿Qué medio funciona mejor con HUVEC ?
1) ¿Cómo se pueden aislar HUVEC a partir de cordón umbilical sin utilizar antibiótico?
En Promocell, las muestras de cordón umbilical se obtienen a partir de donantes sin añadir ni búferes ni medios extra. De esta manera se previene que los microorganismos lleguen a los vasos sanguíneos en los lavados. Antes de comenzar la preparación celular, el cordón umbilical se corta a ambos lados con un escalpelo estéril. Este método permite aislar células endoteliales del cordón umbilical (HUVEC) y sembrarlas en medio libre de antibiótico.
2) ¿En qué se diferencian las HUVEC de Promocell de las ATCC?
Las HUVEC de Promocell están recién asiladas del cordón umbilical. Se criopreservan tras el cultivo primario.
En el caso de las HUVEC de ATCC , se trata de una línea humana hipodiploide de origen endotelial donde el 72% de las células presentan 45 cromosomas y el porcentaje de células poliploides es del 15.8%. Estas células tienen una vida aproximada de 50-60 duplicaciones celulares. Por este motivo, se trata de células ligeramente transformadas, lo que hace que no se trate de ‘celulas normales’.
3) ¿Qué tipo de células endotelial es más recomendable para estudiar angiogénesis?
El estudio de angiogénesis ha avanzado muchísimo en los últimos años gracias a la posibilidad de cultivar células endoteliales in vitro. Las células HUVEC se utilizaron muchísimo aunque con el paso del tiempo se ha visto que las células endoteliales microvasculares son un modelo más apropiado.
4) ¿Cuántos pases aguantan las células HUVEC de Promocell?
Promocell garantiza 15 duplicaciones celulares. El número de pases depende del factor de dilución utilizado durante el subcultivo. Si el pase es 1:4, se pueden duplicar 2 veces por pase, lo que significa que se pueden mantener en cultivo al menos 6-8 pases antes de entrar en senescencia…
5) ¿Las células de Promocell provienen de un único donante o de varios? ¿Qué diferencia hay?
Generalmente provienen de un único donante. De esta forma, la edad, sexo y raza del donante queda detallada de manera específica en cada certificado de análisis por lote.
Cuando es un único donante HUVEC (C-12200) se aísla a partir de un único cordón umbilical, se expande en cultivos primarios, y se congela en subconfluencia.
En el caso de las HUVEC-pooled (C-12203), éstas vienen mezcladas. Se aíslan simultáneamente las células de 2-4 cordones umbilicales y se crecen en cultivos celulares diferentes. Las células se mezclan tras tripsinizar ya que sus ratios de crecimiento son comparables.
6) ¿Qué medio funciona mejor con HUVEC ?
El medio estándar Endothelial Cell Growth Medium (C-22010) se recomienda para aislar y propagar las HUVEC. Contiene ECGS, un extracto de hipotálamo bovino que tienen un efecto mitogénico en la proliferación celular. En caso de preferir un medio más definido se utiliza Endothelial Cell Growth Medium 2 (C-22011). En este medio el ECGS es sustituido por VEGF, IGF y bFGF/EGF adicional para estimular el crecimiento celular.
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