SensiDeath es kit para la detección de la muerte celular. Aprovechando la alta sensibilidad de la qPCR, SensiDeath proporciona un método sencillo para detectar la muerte celular en fases más tempranas mediante la cuantificación de fragmentos de ADN genómico liberados en el citoplasma.
Volver a la página anterior
SensiDeath
Como funciona?
SensiDeath se basa en la cuantificación del ADN genómico liberado en el citosol celular, un proceso clave iniciado tras la muerte celular y un valioso marcador de apoptosis. Mediante la amplificación del ADN genómico presente en fracciones citosólicas aisladas, se pueden comparar rápidamente los niveles relativos de células apoptóticas en una amplia gama de muestras de células humanas.
El protocolo es muy simple:
1- Lisa las células utilizando la solución tampón incluida en el kit, una solución que altera específicamente la membrana plasmática celular
2- Centrifuga el lisado para recuperar la fracción citosólica
3- Amplifica las secuencias específicas presentes en el genoma mediante PCR cuantitativa utilizando los cebadores optimizados del kit.
4- Evalua la muerte celular, directamente proporcional al enriquecimiento citosólico en ADN genómico
-
-
-
- Tipos de muestras: células humanas (adherentes y en suspensión)
- Análisis: Técnicas basadas en PCR (PCR cuantitativa, PCR digital droplet).
-
-
Preguntas frecuentes:
¿Qué muestras se pueden analizar con SensiDeath?
SensiDeath se ha utilizado con éxito para detectar la muerte celular en una variedad de líneas celulares humanas, entre las que se incluyen:
– Células adherentes: HepG2, MDA-MB-231, HeLa, SK-Hep, HEK293, HUVEC, fibroblastos primarios, etc.
– Células en suspensión: OCI-AML3, MOLM14, MV4-11, HL-60, THP-1, U937, etc.
Esta lista no es exhaustiva y SensiDeath podría utilizarse para evaluar la muerte celular en cualquier otro tipo de célula humana.
¿Requiere algun material o equipo específico?
Los kits SensiDeath contienen un tampón de lisis concentrado y cebadores optimizados para la amplificación del ADN genómico. El único reactivo necesario es agua libre de nucleasas y cualquier mezcla SYBR Green qPCR.
En cuanto al equipamiento, se necesita una simple centrífuga de sobremesa para la preparación de las muestras y un termociclador para realizar la qPCR. No se necesita ningún equipo sofisticado.
¿Qué fase(s) de apopotosi se detecta con SensiDeath?
La presencia de ADN nuclear en el citosol puede detectarse en las fases temprana, media y tardía de la apoptosis. La concentración citosólica de ADN nuclear será máxima en la fase media, pero la extrema sensibilidad del método SensiDeath permite detectarla también en sus fases más tempranas.
¿Puede el ADN mitocondrial influir en el ensayo?
No, nuestro tampón de lisis suministrado en el kit ha sido optimizado específicamente para romper la membrana plasmática de la célula, dejando la membrana nuclear, así como la de todos los demás orgánulos, perfectamente intacta. Por lo tanto, no hay riesgo de recuperar ADN mitocondrial en las fracciones citosólicas aisladas.
¿Puedo usar otro tampón de lisis que el incluido en el kit?
El tampón de lisis SensiDeath incluido en el kit se ha desarrollado específicamente para destruir la membrana plasmática de la célula manteniendo intacta la membrana de los núcleos y otros orgánulos, lo que permite la recuperación específica de la fracción citosólica. Además, sus componentes han sido optimizados para no interferir con las reacciones qPCR posteriores. Por lo tanto, no recomendamos el uso de otros tampones de lisis, ya que no podemos garantizar la exactitud de las mediciones de muerte celular obtenidas.
I am text block. Click edit button to change this text. Lorem ipsum dolor sit amet, consectetur adipiscing elit. Ut elit tellus, luctus nec ullamcorper mattis, pulvinar dapibus leo.
Si quieres más información sobre Idylle o sobre este producto, no dudes en contactar con nosotros:
