UbiClear es un método innovador para la limpieza óptica de muestras biológicas. Gracias a su formulación única, la solución UbiClear hace transparentes muestras gruesas en menos de 20 minutos sin ningún compuesto tóxico. Basta con colocar la muestra en el tampón de limpieza, incubarla a 37 °C y transferirla a la solución de imagen. Una forma fantástica de poner el clearing al alcance de cualquiera.
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UbiClear
No tóxico
Solución acuosa
Compatible con marcajes fluorescentes
Versátil
Para distintos tipos de tejido
Muy rápido
Cuestión de minutos
UbiClear es una solución acuosa que modifica las propiedades ópticas de tejidos biológicos complejos mediante la eliminación de lípidos y la homogeneización de los índices de refracción: los tejidos opacos se vuelven transparentes manteniendo intacta su estructura original.
El flujo de trabajo de UbiClear es sencillo y no requiere conocimientos específicos ni acceso a equipos sofisticados.
1- Depigmentación (1h a 37 ºC)
2- Limpieza (de 20 min a toda la noche, en función del tejido)
3- Imágenes y almacenamiento a largo plazo
Fragmento de cerebro de ratón de 1 mm de grosor (tejido adiposo), fragmentos de intestino de ratón de 2 cm y fragmento de rodilla de buey de 1 mm de grosor (cartílago y hueso articular, tejido calcificado).
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Preguntas frecuentes:
¿Para qué tipo de mustras está pensado el uso de UbiClear?
UbiClear puede utilizarse para limpiar un amplio espectro de muestras, desde pequeñas estructuras celulares en 3D hasta organismos enteros. Hasta ahora, UbiClear ha demostrado una limpieza eficaz de:
– Estructuras celulares 3D: cuerpos embrionarios humanos, minicerebros humanos.
– Tejidos humanos: corteza frontal.
– Secciones de tejido de ratones (1 mm de grosor): médula espinal, cerebro (cerebelo, plexo coroideo), testículos, vesícula seminal, oreja (cartílago elástico y pelo), pulmones, corazón, intestino, riñón, músculo esquelético, membranas del saco vitelino.
– Tejidos de buey (1 mm de grosor): rodilla (cartílago articular y hueso)*.
– Plantas: hojas de hiedra, rodajas de zanahoria, raíces de remolacha, organoides de microcallos y callos, estambres de capuchina, semillas de melón, semillas germinadas de tomate, rodajas de tallo de rosa.
– Órganos enteros: cerebro, corazón, intestino, ojo, dientes* y ganglios de la raíz dorsal de ratón.
– Organismos enteros: Colisa Lalia, pez cebra, chinche de fuego (Pyrrhocoris apterus), avispa, saltamontes, arañas, chinches escudo (Graphosoma lineatum), moscas, cucarachas.
– Crustáceos: cochinilla.
– Moluscos: babosa, mejillón (incluida la concha)*.
*Para las muestras de huesos y dientes, es necesario realizar un paso adicional de desmineralización antes de la limpieza.
¿Es reversible?
Sí, es posible reopacificar las muestras incubándolas en un tampón Tris 0,2 M a pH 8. La reopacificación puede ser una forma práctica de seleccionar y seccionar una región de interés para ensayos posteriores (por ejemplo, inmunotinción).
¿Cuál es el índice de refracción de la solución de imagen?
La solución de imagen final obtenida siguiendo nuestro protocolo de uso (es decir, diluyendo la solución Mix 2 en agua) tiene un índice de refracción de 1,47. Es posible aumentarlo hasta 1,485 añadiendo menos agua a la solución Mix 2.
¿Como funciona UbiClear?
UbiClear efficiently clears biological tissues by removing lipids (Mix 1) and homogenizing refractive indexes (Mix 2) of the sample’s internal components. The clearing solution is prepared by mixing Mix 1 & Mix 2, and the imaging solution is prepared by diluting Mix 2 in water.
¿Podré visualizar la fluorescencia endógena después del aclarado con UbiClear?
Sí, la fluorescencia endógena se conserva tras el aclaramiento (esto se ha demostrado con dT-tomato y GFP). Si su muestra contiene una proteína fluorescente nativa, simplemente debe omitir el paso opcional de despigmentación, ya que es probable que interfiera con la señal de fluorescencia.
¿Para qué no está indicado el uso de UbiClear?
Dado que UbiClear elimina los lípidos de las muestras, esta solución no es adecuada para la obtención de imágenes y la tinción de lípidos. Tampoco es compatible con colorantes directos de ácidos nucleicos (DAPI, BET, verde de metilo y Topro3). Si se espera una tinción de ADN, recomendamos utilizar estrategias de marcaje indirecto con anticuerpos.
¿Con qué método de fijación es compatible UbiClear?
Hasta ahora, el kit UbiClear se ha utilizado con éxito en muestras aclaradas utilizando formalina al 10% (o PFA al 4%), y por lo tanto este es el método de fijación que recomendamos. Es posible que el aclarado funcione bien con otras soluciones de fijación, pero no podemos garantizar que la eficacia del aclarado sea similar.
