Methyldetect es una empresa danesa que proporciona ensayos de metilación de ADN rápidos, sensibles y cuantitativos que se pueden utilizar en equipos de laboratorio ampliamente disponibles. Methyldetect proporciona tecnología de fusión de alta resolución sensible a la metilación (MS-HRM) para investigadores en el campo de la epigenética.
El número de citosinas (C) en un producto de PCR, amplificado a partir de una muestra modificada con bisulfito de sodio, depende del estado de metilación de las citosinas en la muestra no modificada. El bisulfito de sodio conserva las citosinas metiladas y modifica las citosinas no metiladas en uracilo, que posteriormente se sustituye por timina durante la PCR. Por lo tanto, si el locus está metilado, se obtiene un producto de PCR rico en C y un producto de PCR rico en T si el locus no estaba metilado. Estos productos de PCR mostrarán diferentes perfiles de fusión cuando se sometan a análisis MS-HRM.
El producto de PCR amplificado a partir de la versión no metilada de un locus específico tendrá una temperatura de fusión relativamente baja y se desnaturaliza (curva roja). El producto de PCR amplificado a partir de la versión metilada del mismo locus, mostrará un perfil de desnaturalización a temperaturas más altas (curva azul).
En resumen, MS-HRM es un método de detección de metilación por PCR que depende de la modificación con bisulfito y permite una evaluación rentable, rápida y altamente sensible del estado de metilación específico del locus.
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